尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用(一)

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【摘要】 目的： 探讨尿核基质蛋白22（NMP22）检测对膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用价值. 方法：采用酶联免疫法（ELISA）检测45例膀胱癌、30例非膀胱癌泌尿系疾病、20例健康志愿者尿中NMP22水平并进行比较. 结果： 膀胱癌组NMP22平均为38.7×103U/L高于非膀胱癌泌尿系疾病组（8.7×103U/L）和健康志愿者组（7.1×103U/L, P0.05)，复发病例（30.7×103U/L）高于未复发患者(6.1×103U/L, P0.05). 结论： 尿NMP22对膀胱移行细胞癌具有高灵敏度和无创伤性，是检测膀胱移行细胞癌的有效标志物，并可用于判断术后有无复发.

【关键词】 尿核基质蛋白22；癌，移行细胞；膀胱肿瘤；诊断；复发监测

0引言
　　
　　膀胱移行细胞癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中70%为浅表肿瘤，且有易复发的特征，5 a内复发的可能性为50%~70%，大多数肿瘤在1 a复发〔1〕. 早期发现，定期术后随访，检测复发是膀胱肿瘤成功治疗的关键. 目前临床上常用的诊断及复查方法为膀胱镜检查、尿脱落细胞检查及B超检查. 膀胱镜检查具有侵袭性，许多患者难以接受；尿脱落细胞检查及B超检查虽非侵入性，但灵敏度不高〔2〕. 近年来随着分子生物学的发展，尿核基质蛋白22（NMP22）成为临床研究较多的指标之一〔3〕. 我们对自膀胱移行细胞癌患者进行了尿NMP22的检查，并进行手术后的复发与未复发的动态观察.

　　1对象和方法

　　1.1对象2004?01/2005?12收治膀胱癌组患者45例，男35例，女10例；年龄29~81（平均55.7）岁. 其中行膀胱部分切除术12例，TURBT32例. 膀胱癌术后随诊3 mo~2 a. 术后20例复发，25例未复发，复发率44.4%. 均有血尿，行膀胱镜检+活检诊断为膀胱移行细胞癌，所有复发病例均经病理证实. 非膀胱癌泌尿系疾病30例，男16例，女14例. 年龄30~85（平均47.8）岁. 其中尿石症10例，泌尿系感染（单纯）6例，前列腺增生伴出血8例，前列腺癌1例，肾癌4例，尿道狭窄1例. 健康志愿者20例，男13例，女7例，年龄35~69（平均53.5）岁.

　　1.2方法所有尿样均在行膀胱镜检、导尿等腔内操作前于08:00~12:00一次性收集. 标本分2份： 1份查NMP22，1份行尿脱落细胞学检查. 查NMP22的尿样标本收集后避光保存，立即转入含有防腐剂的尿样收集瓶500 r/min离心15 min后取上清夜转入塑料试管中3~20℃保存. 实验 NMP22试剂盒由美国Matritech公司生产，严格按试剂盒说明书操作，采用双抗体夹层免疫酶标法用酶标仪测得吸光度，建立标准曲线，取得样品NMP22的测定值（单位U/L）.

　　统计学处理：参照文献以10.0×103 U/L为NMP22检测临界值，所有数据采用SPSS统计软件包处理. 尿NMP22各组之间比较采用非参数秩和检验. P0.05为有统计学差异.

　　2结果

　　2.1NMP22含量45例膀胱癌NMP22为7.9×103~158.0×103U/L，非膀胱癌泌尿系疾病MP22为2.1×103~17.1×103U/L，健康志愿者NMP22为1.4×103~10.3×103U/L，膀胱癌患者尿中NMP22浓度高于非膀胱癌泌尿系疾病和健康志愿者（P0.05）.

　　2.2NMP22与尿脱落细胞学以10.0×103U/L为NMP22检测阳性临界值，NMP22与尿脱落细胞学诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值有一定差异（表1），NMP22敏感性高于尿脱落细胞学检查（P0.01），但特异性稍低.

　　表1NMP22和尿脱落细胞学敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值（略）

　　2.3NMP22在膀胱癌术后复发中的检测45例膀胱癌术后复发20例患者尿 NMP22中位数为30.7×103U/L，25例未复发患者尿 NMP22中位数为6.1×103U/L（P0.01）. 以10.0×103U/L为最适临界值，复发病例NMP22≥10.0×103U/L者15例，NMP2210.0×103U/L者5例；未复发病例NMP22≥10.0×103U/L者5例，NMP2210.0×103U/L者20例，敏感性75%，特异性80.0%.

　　3讨论
　　
　　核基质蛋白（nuclear matrix protein, NMP）是核基质的重要组成部分，有多种结构和功能，并且有较强的组织器官特异性〔4〕，最早于由Berezney等〔5〕报道. NMP22属于核基质蛋白的一种，又称为有丝分裂器蛋白. 是构成细胞核网状结构的一个组成部分，与DNA的复制、转录、RNA合成及基因表达的调控有关. NMP22为核有丝分裂装置蛋白（NuMAP）的一个亚单位. NuMAP与有丝分裂期间纺锤体的形成有关，其主要供能为在细胞有丝分裂末期使染色体正确、均匀地分配到子代细胞〔6〕. 因此，NMP22与细胞增殖活跃的组织关系密切. 据报道，体外培养的膀胱癌细胞内NMP22浓度较正常膀胱移行上皮细胞至少增加25倍〔7〕. 由于膀胱癌中NMP22在细胞凋亡中以可溶性复合物片断形式随尿排出，而这个被释放的片断可通过双单抗酶联免疫法予以测定，检测限达到pg级，这使得尿的NMP22成为膀胱肿瘤的特有标记物.