灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠记忆障碍的改善作用(一)

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作者：石艳华 缪红 苏丙凡 程建军 商亚珍

【摘要】 　　目的研究灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠衰老的改善作用。方法小鼠腹腔注射120 mg/kg D-半乳糖 48 d制备衰老模型，通过小鼠学习/记忆能力及胸腺、脾脏和睾丸的脏器指数的测定，评价灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠衰老的作用。结果D-半乳糖明显引起小鼠衰老症状，与空白对照组相比，D-半乳糖组小鼠(120 mg/kg,ip,47～48 d)学习/记忆能力显著降低，胸腺、脾脏和睾丸的脏器指数也明显异常改变。5，10和20 mg/kg 灯盏花素不同程度地改善D-半乳糖引起小鼠上述衰老症状。结论灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用。

【关键词】 灯盏花素 D-半乳糖 衰老 记忆障碍

　　Abstract:Objective To study the improving effects of breviscapine (Bre) on aging induced by D-galactose in mice.MethodsThe aging model of mice was made by introperitoneal injection of 120 mg/kg D-galactose for 48 d. The anti-aging effects of Bre were eva luated by the learning and memory ability, thymus,spleen and testicle index measurements. ResultsD-galactose(120 mg/kg, ip, 47～48 d) significantly resulted in the senescent symptoms in mice. pared with control group, the D-galactose mice could decrease learning and induce the memory ability, and induce the abnormal changes of thymus,spleen and testicle index. 5, 10 and 20 mg/kg Bre significantly improved the above abnormal alterations in different degree induced by D-galactose.Conclusion Bre has significant improving effects on memory deficits induced by D-galactose in mice.

　　Key words：Breviscapine； D-galactose； Aging； Memory deficits

　　老年性痴呆（Senile dementia）是发生于老年期一种慢性进行性神经减退性疾病，以进行性记忆认知障碍、人格改变为主要特征〔1〕。一系列动物模型用于老年性痴呆病理生理研究和药物筛选，其中连续给动物注射D-半乳糖可以引起组织、细胞一系列退行性变化，最终表现为学习记忆功能降低、神经病理学改变以及自由基、免疫系统等异常改变，而这些状况都与自然衰老脑老化表现近似〔2〕。那么能否改变此模型的各种异常改变，可以在一定程度上预示一种药物用于老年性痴呆病治疗的可能。

　　灯盏花素（Breviscapine，Bre）是从菊科短亭飞蓬属植物灯盏细辛全草中分离得到的黄酮类化合物，是灯盏花乙素和灯盏花甲素的混合物，以灯盏花乙素为主〔3〕。灯盏花民间用于治疗跌打损伤、风湿疼痛、牙痛、感冒等；灯盏花素临床上用于治疗高血压病、冠心病、脑出血和脑血栓等疾病；其制剂安全范围大，不良反应少〔4〕。临床应用灯盏花素对神经血管性疾病治疗有效，但对D-半乳糖引起的动物衰老作用未见报道。本实验采用小鼠连续注射大剂量D-半乳糖制备脑衰老模型，探讨灯盏花素对小鼠脑衰老的保护作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物与药品

　　昆明种小鼠（23～26 g，♂），本院实验动物中心提供；灯盏花素，云南省玉溪望子龙生物制药有限公司生产。

　　1.2 方法

　　1.2.1 程序

　　50只小鼠随机分5组，除空白对照组外，各组小鼠分别连续ip D-半乳糖120 mg/kg 48 d，Bre 3个剂量组小鼠在同上ip D-半乳糖的同时，分别连续皮下注射（Subcutaneous injection，sc）Bre 5，10和20 mg/kg 48 d，1次/d。在开始实验第43天，各组小鼠在皮下注射（sc）药物30 min后进行小鼠水迷宫学习能力测试；记录所有动物一般外观表现；水迷宫测试后，在sc 药物第48天末次给药30 min后，断头处死小鼠，肉眼观察脏器变化，计算脏器指数。

　　1.2.2 小鼠水迷宫学习能力测试

　　采用小鼠水迷宫行为实验法。迷宫是80 cm×50 cm×20 cm双层不透明有机玻璃箱，内设起始点、终点平台和4个盲端，平台附近为安全区，并放台灯标示。实验时迷宫水深12 cm，实验室温度保持（20±1）℃，迷宫周围一切空间标志在整个实验过程中保持不变。正式实验前1天，令每只小鼠在迷宫中熟悉水环境120 s，第2天开始正式实验。在水迷宫起始点将小鼠面向壁放入水中，记录小鼠放入水中到达终点平台时间（潜伏期：Latency）和进入盲端的次数(Number Errors)。如小鼠在60 s内未到达终点平台，可帮助式地将小鼠赶至平台，并令其在平台上呆20 s，每日上下午各训练1次，连续测试5 d，取两次平均值作为小鼠学习成绩。

　　1.2.3 动物外观观察和脏器指数的测定

　　小鼠在sc 药物后，记录所有小鼠外观表现，在第48天末次给药30 min后，断头处死小鼠，肉眼观察脏器变化，计算睾丸、胸腺和脾脏的脏器指数。

　　脏器指数（mg/g ）= 脏器重量（mg）÷ 动物体重（g）