桑杏汤对温燥小鼠血清与呼吸道抗体的影响(一)

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作者：丁建中， 龚权， 张六通， 邱幸凡， 陈刚，朱慧玲， 张渊

【关键词】 外燥；,,桑杏汤；,,血清；,,呼吸道；,,抗体

　　摘要：目的 观察桑杏汤对温燥小鼠血清IgG（IgGS）、呼吸道液IgG(IgGR)与呼吸道黏多糖（RS）的影响。方法54只SPF级昆明小鼠随机分为常温常湿组（A组）、温燥对照组（B组）和温燥治疗组（C组），每组18只。药物处理后第5天检测IgGS，IgGR，RS（μg/ml）与脾脏及胸腺平均重量（mg）。结果 B组IgGR（2.30±0.32）明显低于A组（5.68±0.64，P0.01），C组RS、IgGS明显高于A组，且该组IgGR接近A组，但胸腺平均重量低于其它二组（P＜0.01）。结论温燥可致小鼠气道IgGR降低而抵抗力下降；桑杏汤主要作用机理是促进肺津生成而润燥，加之增加气道IgGR，共同增强气道御邪能力。结果还为中药药物归经理论提供实验证据。

　　关键词：外燥； 桑杏汤； 血清； 呼吸道； 抗体

　　Abstract：ObjectiveTo investigate the effects on IgG in Serum(IgGS) and respiratory(IgGR)and mucus(RS)and weight of spleen and thymus(mg) in WarmDry with "SangXing Tang". Methods54 kunming mice(SPF) were divided into three groups including group A(normal mice),group B(control mice),group C(cure mice),18 mice/group.RS（μg/ml）,IgGS,IgGR and weight of spleen and thymus(mg) were measured on day 5 after treated with the herbs.ResultsIgGR of group B(2.30±0.32) was obviously lower than those of group A(5.68±0.64,P0.01);RS,IgGS of group C were higher than that of group B(P0.01) and IgGR was not different significantly with that of group A(P>0.05).ConclusionThe results were first provided evidences that the mechanism of "SangXing Tang" were greater stimulated RS and IgG-R to protected the defend function of respiratory in Warm-Dry.

　　Key words：WarmDry; Sang-Xing Tang; Serum; Respiratory; Antibody

　　“一交秋分，燥金司令，所起之风，全是一团燥烈之气，干而不润。是以无草不黄，无木不凋，人身应之，燥病生焉。凡有身热咳嗽、内烦口干一切百病，无不起于干燥。”（《医学传灯?卷上》）燥邪初伤肺气，布津失职，则见肺经燥热化火、耗劫阴液之候，温燥之证辨治应辛凉甘润，桑杏汤为之经方并沿用至今。由于燥证辨证论治文献零散，至今未见对治疗外燥经典方作用机理的实验研究〔1〕。呼吸道液分泌功能与气道IgG抗体是气道重要保护机制之一。在已有资料显示外燥可致实验小鼠气道炎性病变基础上，本文研究桑杏汤对温燥小鼠气道液分泌、血清与呼吸道液抗体的影响，为阐析桑杏汤作用机理与扩大临床应用提供实验依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 主要仪器与试剂 LRH250人工智能气候箱（温度：30~65℃±1℃，相对湿度：30%~90%，广东）；LG风扇程控仪（MASTERK30H,韩国），低温冰箱（VXE380，85℃,法国），酶标检测仪（KHB ST360,上海），分析天平（MonoBioc AB304S,瑞士）。IgG ELISA试剂盒（华美生物工程公司，批号：200501）。主要试剂：咔唑（Singam）、D葡萄糖醛酸内酯（Singam）、四硼酸钠（上海），其余试剂均为A.R。

　　1.2 实验动物SPF级昆明小鼠54只，体重(18±1)g，雌雄各半，湖北省实验动物研究中心提供，许可证号：SCXK（鄂）20032005。

　　1.3 实验药物桑杏汤（《温病条辨》）组方：桑叶 9 g ，杏仁 9 g，沙参15 g ，象贝母 12 g ，香豉 6 g ，栀子皮 12 g， 梨皮 12 g。生药由湖北省荆州中药材公司提供。取1剂，加3倍水浸泡2 h后微火煎至100 ml，重复3 次，将3 次煎液过滤并混匀，水浴浓缩至200 ml，其生药量为364 g/L。按临床成人剂量计算，C组动物按0.009 g?kg1?d1生药量给予灌胃处理，1次/d，连用5 d。A组与B组用无菌生理盐水代替药物。

　　1.4 方法

　　1.4.1 实验动物在实验室常规饲养7d后随机分为3组：常温常湿组（A组）、温燥对照组（B组）、温燥治疗组（C组），每组18只，置人工气候箱内常规饲养，按表1“温度－相对湿度－风”条件综合刺激进行造模。第7天进行药物治疗。表1 各组小鼠“温度相对湿度风”处理条件（略）

　　1.4.2 呼吸道液黏多糖测定（RS,μg/ml）：咔唑比色法〔2〕。药物处理后第5天、各组小鼠在剖杀前4 h禁食、禁水。断颈处死小鼠并暴露气管，从喉头处行气管插管，缓慢推注37℃预温的无菌生理盐水1 ml，回抽此液并重复2次，离心取上清液检测RS。每份标本分为2 个稀释度，每个稀释度测定2 次,取均值。用3 mmol/L氯化钠稀释D葡萄糖醛酸内酯为25~300 μg/ml并制作工作曲线（n=8,r=0.899 2）。

　　1.4.3 血清IgG检测（IgGS）：ELISA方法〔3〕。药物处理后第5天、各组小鼠在处死前4 h禁食、禁水。常规眼球取血并分离血清、置65℃备检。每份标本重复测定2 次，取均值。以包被液作空白对照，PBS pH7.4（10%小牛血清）作阴性对照。记录标本均值与阴性对照（P/N）倍数之平均值。

　　1.4.4 呼吸道液IgG检测（IgGR）: 各组标本获取方式同RS测定，用ELISA方法〔3〕。

　　1.4.5 小鼠脾脏与胸腺平均重量检测（均重，mg）：由专人常规剖取实验小鼠脾脏与胸腺后，立即经1/万分析天平重复称重3次，取均值。