茉莉花叶总黄酮的超声波提取及鉴别(一)
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作者：罗建华， 蒙春越， 张丽丹， 刘娇， 黄锁义
【关键词】 超声波提取；,,茉莉花叶；,,总黄酮；,,鉴别
摘要：目的为充分利用茉莉花叶植物资源，避免资源的浪费，探讨茉莉花叶总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从茉莉花叶中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.217 6 mg/ml，回收率为102.8%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取茉莉花叶黄酮类物质的有效途径。
关键词：超声波提取； 茉莉花叶； 总黄酮； 鉴别
The Extraction and Identification of the Total Flavanone of Leaves from jasmiaum sambac air by Ultrasonic Wave
Abstract：ObjectiveTo make use of the resources of the leaves of Jasminum sambac Air, avoid wasting and approach the extraction of total flavanone and identification of the leaves from Jasminum sambac Air. MethodsThe flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from the leaves of Jasminum sambac Air with ultrasonic wave. Spectrophotometry was used to determine and extract the content of the flavanone from the leaves of Jasminum sambac Air.ResultsBy this method the content of the total flavanone of the leaves of Jasminum sambac Air was C=0.2176 mg/ml and the rate of recovery was 102.8%.ConclusionThis text provides the extraction and purification methods to get the oute. The purity of the flavanone is very high .This method is a purely physical process and has no pollution. It is an ideal way to extract the flavanone of the leaves of Jasminum sambac Air.
Key words：Ultrasonic wave treatment; The leaves of Jasminum sambac Air; Total flavanone； Identification
茉莉花为木犀科植物茉莉的花Jasminum sambac (L．)Air，为常绿灌木幼枝圆柱形，有时近倒卵形，披短柔毛，单叶对生；花期6~11月，花后通常不结果，多栽培湿润肥沃土壤中， 分布于江苏、浙江、福建、台湾、广东、四川、云南等地。具有理气、开郁、辟秽和中、清虚火去寒疾、治疮毒、消疽瘤等功效，因其独特的芳香，多作茶饮用，是具有广泛药用价值的植物〔1〕。茉莉花的药理作用有〔2，3〕：散陈腐之气，辟秽浊之毒，平肝解郁，和中止痛。可用于治疗下痢腹痛、疮毒、结膜炎、耳心痛等病证，有较好的疗效。茉莉花的根、叶、花均有药用价值。根有麻醉、止痛之功效，可以用于治疗失眠、头痛、龋齿、跌打损伤；叶用于治疗外感发热、腹胀腹泻；花可用于治疗腹胀腹泻、结膜炎、皮炎、疮毒等。研究表明〔4〕，茉莉花含有环烯醚萜苷、黄酮苷、苄基苷等。目前国内外对银杏类黄酮的研究较多，但对于茉莉花植物中黄酮类化合物的研究还相对缺乏。目前有用水、石油醚、乙醇分别从植物中提取黄酮类化合物的报道〔5〕，但是这几种方法提取的时间长、工艺复杂、提取效率较低。目前，对茉莉花的研究多是花香精油的提取和应用〔3〕，而提取茉莉花植物中的黄酮及其鉴别的研究国内外尚未见报道。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道〔6~8〕，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响〔7〕，但超声技术应用于提取茉莉花叶中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取茉莉花叶总黄酮及鉴别。
1 仪器与试剂
1.1 仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器（超声工作频率40 KHz，江苏省昆山市超声仪器有限公司）；UV-755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHB-III循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。
1.2 试剂 95%乙醇；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；乙酸镁AR；镁粉AR；正丁醇AR；冰醋酸AR；醋乙酸乙酯AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；茉莉花叶采自右江民族医学院校园内。
2 方法与结果
2.1 总黄酮成分提取取新鲜茉莉花叶，烘干，粉碎。称取茉莉花叶粉末约6 g，加80 ml 95%乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤。滤渣再加80 ml 95 %乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩25 ml左右为止，放置250 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。
2.2 测定方法依据 以芦丁为对照品测定茉莉花叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。
2.3 定量实验-总黄酮的含量测定
2.3.1 波长的选择 取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420~700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
2.3.2 标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.10 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12 min，以试剂作空白参比液，于510 nm处测吸光度。吸光度测定结果见表1。
表1 紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度的结果（略）
根据上表得回归方程：A=-0.031 10+13.52C，r=0.999 9。
2.3.3 提取物含量的测定精密吸取样品液0.50 ml，置10 ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定吸光度A=0.116，根据回归方程：A=-0.031 10+13.52C，计算样品中总黄酮的含量C=0.217 6 mg/ml。
2.3.4 回收实验 精密量取样品液2.00 ml，加入标准芦丁对照品2.00 ml（0.10 mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为102.8% 。