酸枣仁合剂的薄层鉴别及酸枣仁皂苷A的含量测定(一)

详细内容

【摘要】 目的：建立酸枣仁合剂的鉴别和含量测定方法。方法：采用TLC法和HPLC法。结果：TLC法鉴别酸枣仁合剂中知母、茯苓和川芎等药材；HPLC测定酸枣仁皂苷A的含量，酸枣仁皂苷A在0.55～1.1 mg/mL范围内线形关系良好（r＝0.9997），平均加样回收率为100.45%，RSD为1.30%。结论：鉴别重复性好、专属性强，含量测定方法简便，准确。

【关键词】 酸枣仁合剂；薄层色谱法；高效液相色谱法；酸枣仁皂苷A

〔Abstract〕 Objective:To identify Rhizoma Anemarrhenae, Poria and Rhizoma Chuanxiong, and to assay jujuboside A in Suanzaoren mixture. Methods:TLC and HPLC were used.Results:The spots of TLC were fairly clear. The HPLC method showed good repeatability. The linear range was 0.55～1.1 mg/mL, and the average recovery of jujuboside A was 100.45% with RSD of 1.30%. Conclusions:The method is simple, repeatable, aurate, and can effectively control the quality of Suanzaoren mixture.

〔Key words〕 Suanzaoren mixture; TLC; HPLC; Jujuboside A

酸枣仁合剂源于酸枣仁汤，出自汉代张仲景《金匮要略・血痹虚劳脉证并治第六》。方中酸枣仁养肝血、安心神为君药；川芎调血养肝、茯苓宁心安神为臣药；知母滋阴降火、清热除烦为佐药；甘草和中缓肝为使药。本方主治肝血不调、虚火内扰心神所致的心烦失眠等症。酸枣仁皂苷A为镇静催眠的有效成分之一，我们在文献〔1〕方法的基础上，改进提取、纯化方法，对酸枣仁合剂中酸枣仁皂苷A进行了测定，并对处方中部分药材进行了薄层鉴别，结果较为满意。

1 材料与仪器

LC?10A高效液相色谱仪（日本岛津公司），电子天平（B?N型，梅特勒?托利多仪器上海有限公司）。酸枣仁皂苷A对照品（734?9404），知母、茯苓和川芎对照药材均购自中国药品生物制品检定所，酸枣仁药材自购，经四川大学华西药学院王天志教授鉴定。酸枣仁合剂为四川志远嘉宝药业有限责任公司制备，其余试剂均为分析纯。

2 薄层鉴别

2.1 知母的薄层鉴别

取酸枣仁合剂样品20 mL，加乙醇40 mL，超声处理30 min后，加入浓盐酸2 mL，超声处理30 min，过滤，滤液浓缩至约5 mL，加水10 mL，用苯萃取2次，每次20 mL，分取苯层，用1%氢氧化钠溶液10 mL洗涤1次后，水洗3次，每次10 mL，苯萃取液水浴挥干，残渣加苯1 mL溶解即得。另取知母对照药材3 g，用水50 mL回流提取1 h，过滤，滤液照供试品溶液方法制备知母对照药材溶液。取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一含0.4%CMC?Na的硅胶G薄层板上，以苯?丙酮（10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于室温、日光下检视，样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照在相应位置无此斑点。

2.2 茯苓的薄层鉴别

取酸枣仁合剂样品20 mL，加乙酸乙酯30 mL，超声处理30 min，取乙酸乙酯层，即得。另取茯苓对照药材2 g，加乙酸乙酯10 mL，超声处理30 min，取乙酸乙酯层，即得茯苓对照药材溶液。取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一含0.4%CMC?Na的硅胶G薄层板上，以环己烷?乙酸乙酯（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下观察，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照在相应位置无此斑点。

2.3 川芎的薄层鉴别

取酸枣仁合剂样品20 mL，加乙醚50 mL，超声处理30 min，取乙醚层，减压浓缩至干，残渣加乙酸乙酯2 mL溶解即得。另取川芎对照药材3 g，加水50 mL回流提取1 h，过滤，滤液同供试品溶液制备方法处理即得川芎对照药材溶液。取上述两种溶液各10 mL，分别点于同一含0.4%CMC?Na的硅胶G薄层板上，以环己烷?乙酸乙酯?冰醋酸（2∶1∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下观察，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照在相应位置无此斑点。