高剂量复合螺旋藻多糖辐射保护作用研究(一)
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作者：郭春生 孙晓红 葛蔚 唐超 张丽 于蕾妍 王清吉
【摘要】 目的观察高剂量复合螺旋藻多糖的辐射保护作用。方法高剂量（200 mg・kg-1・d-1）螺旋藻多糖与银杏叶有效成分按1∶1，2∶1和1∶2的比例复合。分别给昆明种小鼠灌服此3种复合制剂及螺旋藻多糖、银杏黄酮、银杏内酯3种单一成分。连续灌服14 d后，用60Coγ射线全身照射，照射后继续灌服16 d。结果与空白组相比，螺旋藻多糖与银杏叶有效成分1∶1比例复合组、2∶1比例复合组、1∶2比例复合组、螺旋藻多糖组、银杏黄酮组和银杏内酯组平均存活时间分别延长了2.3（P＜0.05），2.5（P＜0.01），2.6（P＜0.01），4.0（P＜0.01），3.7（P＜0.01），3.3 d（P＜0.01）；存活率分别提高20%，30%，20%，80%，60%，40%。结论高剂量螺旋藻多糖与银杏叶有效成分复合应用于抗辐射有协同增效作用，可明显延长经60Co γ射线全身照射小鼠的存活时间，提高小鼠存活率。抗辐射作用优于螺旋藻多糖和银杏叶有效成分单一使用组。复合螺旋藻多糖的最佳配比为螺旋藻多糖与银杏叶有效成分等量复合。
【关键词】 螺旋藻多糖 银杏叶有效成分 60Co γ射线 抗辐射 小鼠
Abstract：Objective To observe the antiradiation effect of high dosage pound PSP.MethodsMixed high dosage(200 mg・kg-1・d-1) polysaharides from Spirulina Platensis(PSP) with effective ingredients of Ginkgo biloba(EGB) into the pound at the ratio of 1∶1,2∶1 and 1∶2, fed the mice with the pound and the single ingredients of PSP,flavonoids,ginkgolide for 14 days,then irradiated the mice with 60Co γ radiation,after that fed them with the pound for consecutive 16 days.Resultspared with the control,the average living days of the mice in the groups fed with the pound at the ratio of 1∶1,2∶1,1∶2 and PSP,flavonoids,ginkgolide increased by 2.3（P＜0.05），2.5（P＜0.01），2.6（P＜0.01），4.0（P＜0.01），3.7（P＜0.01），3.3 d（P＜0.01）.The living rates increased by 20%,30%,20%,80%,60%,40%.ConclusionThe results indicated that the pound with high dosage PSP and EGB has the synergic effects in the application of anti-radiation,which can obviously prolong the living days of mice with 60Co γ radiation and enhance the livability.The anti-radiation action is better than any single effective ingredients of PSP and EGB.pound with equal dosage of PSP and EGB is the best in the experiments of anti-radiation.
Key words:PSP; EGB; 60Coγ radiation; Anti-radiation; Mice
长期以来人们承受着来自于医疗、工业和环境等诸多方面的辐射危害，辐射不仅损伤机体的免疫系统，使机体免疫力降低，而且还可引起突变或癌变。目前，人们已发现了一些具有辐射防护作用的药物，这些药物大多为含硫类的化学合成药，如氨磷汀（WR2721）等。但这些化学合成药在有效剂量时毒性很大，所以使用较少。寻找天然无毒副作用的抗辐射药物成为广大科技工作者研究的热点。研究表明〔1～6〕螺旋藻多糖和银杏叶有效成分单独使用就具有较好的抗辐射作用。螺旋藻多糖与银杏叶有效成分都含有大量的羟基和酚羟基结构，根据含有相同或类似官能团的化合物复合能产生协同增效作用的原理，我们将螺旋藻多糖和银杏叶有效成分按不同比例复合，观察其复合后的抗辐射效果。现报道如下。
1 器材
1.1 螺旋藻多糖与银杏叶有效成分螺旋藻购于中国科学院南海海洋研究所三亚站，为浅绿色粉末。参照文献〔7〕，采用三氯乙酸除蛋白法提取螺旋藻多糖，多糖含量占93％以上。
银杏叶有效成分为实验室自提，总黄酮含量≥24％，萜内酯含量≥6％。
1.2 动物昆明种小鼠（SPF级）购于青岛市药检所，体重23～26 g，雌雄各半。
1.3 仪器超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.4 灌服药品配制C组（对照组）：12.5 ml生理盐水与1％羧甲基纤维素钠（CMC）等体积混合，超声波细胞粉碎机混匀5 min；
P组（螺旋藻多糖组）：称取螺旋藻多糖500 mg溶于12.5 ml 生理盐水中，再加等体积1％CMC混合，超声波细胞粉碎机混匀5 min。每只小鼠灌服量为200 mg・kg-1・d-1；
F组（银杏黄酮组）：称取银杏黄酮500 mg溶于12.5 ml生理盐水中，余配制方法同P组。每只小鼠灌服量为200 mg・kg-1・d-1；
L组（银杏内酯组）：称取银杏黄酮500 mg溶于12.5 ml生理盐水中，余配制方法同P组。每只小鼠灌服量为200 mg・kg-1・d-1；
CP1组（螺旋藻多糖：银杏叶有效成分＝1∶1）：称取螺旋藻多糖500 mg，银杏叶有效成分500 mg溶于12.5 ml生理盐水中，再加等体积1％CMC混合，超声波细胞粉碎机混匀5 min。每只小鼠灌服量为螺旋藻多糖、银杏叶有效成分各200 mg・kg-1・d-1；
CP2组（螺旋藻多糖：银杏叶有效成分＝2∶1）：称取螺旋藻多糖500 mg，银杏叶有效成分250 mg，配制方法同CP1组。每只小鼠灌服量为螺旋藻多糖200 mg・kg-1・d-1，银杏叶有效成分 100 mg・kg-1・d-1；
CP3组（螺旋藻多糖：银杏叶有效成分＝1∶2）：称取螺旋藻多糖500 mg，银杏叶有效成分1 000 mg，配制方法同CP1组。每只小鼠灌服量为螺旋藻多糖200 mg・kg-1・d-1，银杏叶有效成分 400 mg・kg-1・d-1。
2 方法
2.1 小鼠饲养管理小鼠自由采食，自由饮水（凉开水），自然光照，定期更换垫料。
2.2 方法选体重相近且健康的小鼠随机分为7组，每组10只，雌雄各半。用灌胃器给各组小鼠灌服相应药物，1次/d，连续灌服14 d后对小鼠进行60Co γ射线全身照射。照射后继续灌服药物16 d，同时观察小鼠的外部表现，记录死亡情况及存活天数。
2.3 辐射条件 60Co γ射线全身照射，源距80 cm，吸收剂量为10 Gy，剂量率为10 Gy/min。
2.4 数据处理数据采用单因素方差分析（LSD）。