PTEN、Galectin?3和Ki?67在胸腺瘤中的表达及其临床意义(一)

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作者：张伟 王铁栓 赵松 陈奎生

【摘要】 目的 探讨磷酸脂酶(PTEN)、半乳糖苷结合蛋白(Galectin?3)和Ki?67在人胸腺瘤发生、侵袭和转移中表达的生物学意义及其相互关系。方法 采用免疫组织化学SP法检测40例胸腺瘤患者中PTEN、Galectin?3和Ki?67的表达。结果 5例正常胸腺组织中，PTEN全部为阳性表达，Galectin?3和Ki?67无阳性表达。40例胸腺瘤组织中，从良性胸腺瘤，侵袭性胸腺瘤到胸腺癌，PTEN阳性表达率逐渐下降，差异有统计学意义(χ2=10.15，P=0.006)；Galectin?3和Ki?67表达率逐渐增高，差异有统计学意义（χ2=6.88，6.78；P=0.032，0.034）；PTEN、Galectin?3和Ki?67的阳性表达率与胸腺瘤的肿瘤性质，Masaoka分期等参数有关（P0.05）；PTEN与Galectin?3和Ki?67的表达呈负相关（r=-0.227，-0.279；P=0.043，0.012）。结论 胸腺瘤的发病分子机制中存在多种基因变异，PTEN的失表达和Galectin?3，Ki?67的过度表达在其发生、侵润和转移中起一定的作用；PTEN、Galectin?3与Ki?67的异常表达密切相关，共同影响着胸腺瘤的发生、发展，三者的检测有助于对胸腺瘤的早期诊断，并判断其恶性程度、侵袭和转移能力及预后。

【关键词】 胸腺瘤；胸腺癌；PTEN；Galectin?3；Ki?67

胸腺瘤是最常见的纵隔肿瘤，约占原发纵隔肿瘤的15%，占前纵隔肿瘤的50%〔1〕，其既有复杂的镜下结构，又存在病理与预后的矛盾〔2〕，发生机制目前仍不十分清楚。本研究采用免疫组织化学方法研究PTEN、Galectin?3及Ki?67在胸腺瘤中的表达情况及其相互关系，探讨其表达与胸腺瘤临床病理学特征的关系，为胸腺瘤的临床诊断、恶性程度的判断、治疗方法的选择及预后的评价提供理论依据。

　　1 资料与方法

　　1.1 标本来源 40例胸腺瘤标本为本院2007年7月至2009年6月经病理证实的手术切除标本。其中男22例，女18例；年龄2～73岁，平均年龄38岁。按照WHO分型〔3〕：A型6例，AB型10例，B1型10例，B2型7例，B3型7例。按Masaoka分期标准〔4〕：Ⅰ期15例，Ⅱ期11例，Ⅲ期9例，Ⅳ期5例。全部标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，切片厚4 μm。用 5例先天性心脏病手术患者正常胸腺组织作对照，其中男 3例，女 2例；年龄2～14岁， 平均年龄 5岁。

　　1.2 试剂和方法 采用免疫组织化学 SP法，鼠抗人PTEN单克隆抗体，兔抗人 Galectin?3多克隆抗体，鼠抗人Ki?67单克隆抗体，SP免疫组织化学试剂盒及二氨基联苯胺（DAB）显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。操作步骤严格按SP免疫组织化学试剂盒说明进行。以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。

　　1.3 结果判断 阳性染色指显微镜下观察细胞内具有清晰可见定位准确的黄色、棕黄色或棕褐色颗粒，而且背景清晰。PTEN蛋白和Galectin?3均定位于细胞浆，Ki?67蛋白定位于细胞核。由2位以上病理医生对免疫组织化学染色进行评价，在400倍视野下任意选择5个视野，每个视野计数200个细胞，细胞无阳性反应或阳性细胞数10%为阴性， 阳性细胞数>10%为阳性。用已知阳性片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。

　　1.4 统计学分析 应用SPSS15.0统计软件进行统计处理，用χ2检验及Fisher's精确概率法进行显著性检验，用Spearman等级相关进行相关性分析。

　　2 结果

　　2.1 PTEN在胸腺瘤中的表达 PTEN在5例正常胸腺组织中全部阳性表达，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有12例（75.0%）阳性表达，17例B1+B2型胸腺瘤患者中仅有5例（29.4%）阳性表达，7例B3型胸腺瘤患者中有1例（14.3%）阳性表达，组间比较差异有统计学意义(P=0.006)。见表1。PTEN在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(57.7%)显著高于Ⅲ+Ⅳ期(21.4%)，差异有统计学意义(P=0.029)。见表2。

　　2.2 Galectin?3在胸腺瘤中的表达 Galectin?3在5例正常胸腺组织中表达微弱，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有7例（43.8%）阳性表达，在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有14例(82.4%)阳性表达，在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达，组间比较差异有统计学意义（P=0.032），见表1。Galectin?3在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(53.8%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(92.9%)，差异有统计学意义(P=0.012)，见表2。

　　2.3 Ki?67在胸腺瘤中的表达 Ki?67在5例正常胸腺组织中无1例阳性表达，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有8例（50.0%）阳性表达，在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有15例(88.2%)阳性表达，在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达，组间比较差异有统计学意义（P=0.034），见表1。Ki?67在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(61.5%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(92.9%)，差异有统计学意义(P=0.034)。见表2。

　　表1 胸腺瘤WHO组织分型与胸腺瘤PTEN，Galectin?3和Ki?67的阳性表达率的关系（略）

　　表2 Masaoka分期与胸腺瘤PTEN，Galectin?3和Ki?67的阳性表达率的关系（略）

　　2.4 PTEN，Galectin?3和Ki?67在胸腺瘤中表达的相关性分析 在胸腺瘤中PTEN和Galectin?3、Ki?67的表达呈显著负相关（r=-0.227,-0.279;均P0.05）。见表3。

　　表3 40例胸腺瘤患者中PTEN与Galectin?3、Ki?67表达的关系（略）